納米顆粒跟蹤分析儀是一種用于實(shí)時(shí)、可視化地檢測(cè)和表征液體中納米級(jí)顆粒(通常為10–2000 nm)的先進(jìn)儀器,廣泛應(yīng)用于納米材料、生物醫(yī)藥、疫苗開(kāi)發(fā)、外泌體研究、環(huán)境科學(xué)及食品工業(yè)等領(lǐng)域。其核心技術(shù)基于激光照明與高靈敏度攝像技術(shù)相結(jié)合,通過(guò)追蹤單個(gè)納米顆粒在布朗運(yùn)動(dòng)下的軌跡,計(jì)算其擴(kuò)散速度,并依據(jù)斯托克斯-愛(ài)因斯坦方程推導(dǎo)出顆粒的流體力學(xué)直徑,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)粒徑分布、濃度及顆粒運(yùn)動(dòng)行為的精確分析。
納米顆粒跟蹤分析儀的組成部分:
一、光學(xué)系統(tǒng)
激光光源
功能:提供高強(qiáng)度、單色性好的激光束(通常為藍(lán)色或綠色激光,波長(zhǎng)405-532nm),作為顆粒散射光的激發(fā)源。
特點(diǎn):激光功率可調(diào),以適應(yīng)不同濃度樣品的檢測(cè)需求;波長(zhǎng)選擇需與顆粒折射率匹配,優(yōu)化散射信號(hào)強(qiáng)度。
光學(xué)透鏡組
功能:
聚焦透鏡:將激光束聚焦至樣品室內(nèi)的測(cè)量區(qū)域,形成高能量密度的光斑,增強(qiáng)顆粒散射信號(hào)。
收集透鏡:收集顆粒散射光,并將其引導(dǎo)至檢測(cè)系統(tǒng)(如CMOS相機(jī)),確保信號(hào)高效傳輸。
設(shè)計(jì)要求:透鏡組需具備高數(shù)值孔徑(NA),以提升光收集效率;同時(shí)需抑制背景噪聲,提高信噪比。
光路調(diào)節(jié)模塊
功能:通過(guò)反射鏡、分光鏡等元件調(diào)整激光路徑,實(shí)現(xiàn)光束的準(zhǔn)直、偏轉(zhuǎn)或分束,以適應(yīng)不同測(cè)量模式(如單角度或多角度檢測(cè))。
應(yīng)用場(chǎng)景:在多角度NTA中,光路調(diào)節(jié)模塊可同時(shí)捕獲顆粒在不同散射角下的信號(hào),提升粒徑分析的準(zhǔn)確性。
二、檢測(cè)系統(tǒng)
高靈敏度相機(jī)(CMOS/CCD)
功能:實(shí)時(shí)捕獲顆粒在激光照射下產(chǎn)生的散射光斑,并記錄其運(yùn)動(dòng)軌跡。
技術(shù)參數(shù):
幀率:需達(dá)到30幀/秒以上,以精確跟蹤顆粒的布朗運(yùn)動(dòng)。
像素尺寸:小像素(如2-4μm)可提升空間分辨率,區(qū)分相鄰顆粒。
動(dòng)態(tài)范圍:高動(dòng)態(tài)范圍(HDR)相機(jī)可同時(shí)檢測(cè)強(qiáng)散射(大顆粒)和弱散射(小顆粒)信號(hào)。
圖像處理單元
功能:對(duì)相機(jī)采集的原始圖像進(jìn)行預(yù)處理,包括背景扣除、噪聲濾波、光斑識(shí)別等,以提取顆粒的清晰軌跡。
算法優(yōu)化:采用自適應(yīng)閾值分割、連通區(qū)域分析等算法,提升光斑檢測(cè)的準(zhǔn)確性和抗干擾能力。
三、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)
軌跡分析軟件
功能:
軌跡重建:根據(jù)顆粒在連續(xù)幀中的位置變化,重建其三維運(yùn)動(dòng)軌跡。
布朗運(yùn)動(dòng)分析:通過(guò)統(tǒng)計(jì)顆粒位移的均方根(MSD),計(jì)算其擴(kuò)散系數(shù)(D)。
輸出結(jié)果:提供粒徑分布直方圖、濃度數(shù)據(jù)(顆粒數(shù)/mL)及統(tǒng)計(jì)參數(shù)(如平均粒徑、多分散性指數(shù)PDI)。
硬件加速模塊
功能:采用GPU或FPGA加速軌跡分析算法,縮短數(shù)據(jù)處理時(shí)間(如從分鐘級(jí)降至秒級(jí)),提升實(shí)時(shí)分析能力。
四、樣品室與流體控制系統(tǒng)
樣品室
結(jié)構(gòu):通常為透明石英或玻璃材質(zhì)的封閉腔體,內(nèi)設(shè)樣品池(如毛細(xì)管或微流控芯片)。
設(shè)計(jì)要求:
光學(xué)透明性:確保激光和散射光無(wú)損耗傳輸。
溫度控制:集成溫控模塊(如帕爾貼元件),維持樣品溫度穩(wěn)定(如25±0.1℃),避免熱脹冷縮影響測(cè)量結(jié)果。
抗污染設(shè)計(jì):采用惰性材料涂層(如特氟龍),減少顆粒吸附或化學(xué)污染。
流體注入與循環(huán)系統(tǒng)
功能:
樣品注入:通過(guò)注射器泵或壓力驅(qū)動(dòng)裝置,將樣品精確注入樣品室,控制注入速度(如0.1-100μL/min)。
循環(huán)流動(dòng):在連續(xù)流動(dòng)模式下,樣品在樣品室內(nèi)循環(huán)流動(dòng),避免顆粒沉降或聚集,提升測(cè)量重復(fù)性。
清洗模塊:測(cè)量完成后,自動(dòng)注入清洗液(如超純水或有機(jī)溶劑),清洗樣品室,防止交叉污染。
五、輔助模塊
校準(zhǔn)模塊
功能:使用標(biāo)準(zhǔn)顆粒(如聚苯乙烯乳膠球,粒徑已知)對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn),驗(yàn)證粒徑測(cè)量精度和濃度線性范圍。
校準(zhǔn)參數(shù):包括粒徑準(zhǔn)確性(誤差≤5%)、重復(fù)性(RSD≤10%)及檢測(cè)限(通常低至10nm)。
環(huán)境控制模塊
功能:監(jiān)測(cè)并控制實(shí)驗(yàn)室環(huán)境參數(shù)(如溫度、濕度、振動(dòng)),避免外界干擾影響測(cè)量結(jié)果。
典型配置:隔振臺(tái)、空調(diào)系統(tǒng)及溫濕度傳感器。
用戶界面與操作軟件
功能:提供圖形化操作界面,支持參數(shù)設(shè)置(如激光功率、相機(jī)曝光時(shí)間)、數(shù)據(jù)保存與導(dǎo)出(如CSV或Excel格式),并生成測(cè)量報(bào)告。
擴(kuò)展功能:支持遠(yuǎn)程控制、多用戶權(quán)限管理及數(shù)據(jù)云端存儲(chǔ)。